ஸ்டெம் செல் ஆராய்ச்சி மற்றும் சிகிச்சை இதழ்

சுருக்கம்

ஃப்ளோ சைட்டோமெட்ரி மற்றும் ரியல் டைம் பிசிஆர் மூலம் அபெரிசிஸ் தயாரிப்புகளில் மெகாகாரியோசைடிக் புரோஜெனிட்டர்களின் அளவு

Leinøe Eva, Nielsen Kaspar R, Baech John, Steffensen Rudi, Dybkaer Karen, Boegsted Martin மற்றும் Johnsen Hans E

பின்னணி மற்றும் நோக்கங்கள்: தன்னியக்க புற இரத்த ஸ்டெம் செல் மாற்று அறுவை சிகிச்சையின் (பிபிஎஸ்சிடி) தர மதிப்பீடு CD34+/CD61+ மெகாகாரியோசைடிக் ப்ரோஜெனிட்டர்களை கிராஃப்ட்டிற்குள் கணக்கிடுவதன் மூலம் மேம்படுத்தப்படலாம். ஃப்ளோ சைட்டோமெட்ரி (எஃப்சி) மூலம் துணைக்குழுக்களைக் கணக்கிடுவது, பிளேட்லெட் அல்லது மைக்ரோஸ்பியர் பின்பற்றுதலில் இருந்து எழக்கூடிய குறைந்த விவரக்குறிப்பு காரணமாக தரப்படுத்த கடினமாக உள்ளது. ஹீமாடோபாய்டிக் ஸ்டெம் செல்களுக்கு பிளேட்லெட் ஒட்டுதலை பகுப்பாய்வு செய்வதையும், CD34 மற்றும் CD61 மரபணு டிரான்ஸ்கிரிப்டுகளுக்கான அளவு நிகழ்நேர பாலிமரேஸ் சங்கிலி எதிர்வினை (RT-qPCR) மதிப்பீட்டை நிறுவுவதையும் நோக்கமாகக் கொண்டுள்ளோம். ஹாட்ஜ்கின் அல்லாத லிம்போமாவில் (NHL) பிபிஎஸ்சிடியைத் தொடர்ந்து தாமதமான பிளேட்லெட் மீட்புக்கான முன்னறிவிப்பாளர்களாக CD34 மற்றும் CD61 ஐப் படிக்க இந்த பகுப்பாய்வு பயன்படுத்தப்பட்டது. பொருள் மற்றும் முறைகள்: தன்னியக்க மாற்று அறுவை சிகிச்சைக்காக அறுவடை செய்யப்பட்ட அபேரிசிஸ் தயாரிப்புகளில் எஃப்சி பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டது மற்றும் வரிசைப்படுத்தப்பட்ட செல்களில் கன்ஃபோகல் மைக்ரோஸ்கோபி பயன்படுத்தப்பட்டது. மருத்துவ மதிப்பீட்டில் அதிக அளவு சிகிச்சை மற்றும் பிபிஎஸ்சிடி மூலம் சிகிச்சை பெற்ற 21 தொடர்ச்சியான என்ஹெச்எல் நோயாளிகளின் லுகாபெரிசிஸ் தயாரிப்புகளின் பகுப்பாய்வு அடங்கும். ஆரம்பகால மீட்பு என்பது 12 ஆம் நாள் அறுவை சிகிச்சைக்கு முன் கவனிக்கப்பட்ட பிளேட்லெட் எண்ணிக்கை > 20x10(9)/L என்றும், 12 ஆம் நாள் பிந்தைய மாற்று அறுவை சிகிச்சைக்குப் பிறகு கவனிக்கப்பட்ட பிளேட்லெட் எண்ணிக்கை <20x10(9)/L என தாமதமாக மீட்கப்பட்டது. RT-qPCR பகுப்பாய்விற்கு CD34+ செல்கள் thawed leukapheresis தயாரிப்புகளிலிருந்து வரிசைப்படுத்தப்பட்டு, RNA பிரித்தெடுக்கப்பட்டு, TaqMan ஆய்வுகளைப் பயன்படுத்தி CD34 மற்றும் CD61 mRNA அளவுகளை மேலும் பகுப்பாய்வு செய்வதற்காக cDNA க்கு மாற்றியமைக்கப்பட்டது. முடிவுகள்: FC ஆல் அடையாளம் காணப்பட்ட CD34+/CD61+ செல்கள், ஒட்டிய முதிர்ந்த பிளேட்லெட்டுகளின் அறிகுறிகள் இல்லாமல், ஒரு குறிப்பிட்ட துணைக்குழுவை உருவாக்குவதாகக் காட்டப்பட்டது. CD34+/CD61+ செல்கள் வெளிப்படுத்திய CD61 mRNA டிரான்ஸ்கிரிப்டுகள் நிரப்பு CD34+/ CD61- கலங்களில் இல்லை. மெகாகாரியோசைடிக் ப்ரோஜெனிட்டர் துணைக்குழுக்களின் எஃப்சி அடிப்படையிலான கணக்கீடு மற்றும் RT-qPCR பகுப்பாய்வு மதிப்பீடு ஆகியவற்றுக்கு இடையே நேர்மறையான தொடர்பு எதுவும் கண்டறியப்படவில்லை. ஆரம்ப மற்றும் தாமதமான பிளேட்லெட் மீட்பு கொண்ட 21 நோயாளிகளின் மாதிரிகளை ஒப்பிடுவதன் மூலம் மருத்துவ தாக்கத்தை மதிப்பீடு செய்ததில் CD61/BACT (β-ஆக்டின்), CD34/ BACT அல்லது CD61/CD34 mRNA, வெளிப்பாடு விகிதங்கள் CD34+ வரிசைப்படுத்தப்பட்ட செல்கள் ஆகியவற்றிற்கு எந்த முன்கணிப்பு தாக்கமும் இல்லை. முடிவு மற்றும் முன்னோக்கு: CD34+/CD61+ கலங்களின் ஒரு குறிப்பிட்ட துணைக்குழுவை FC மற்றும் RTqPCR பகுப்பாய்வு மூலம் அடையாளம் காணலாம்; இருப்பினும் இந்த துணைக்குழுவின் கணக்கீடு பிபிஎஸ்சிடிக்குப் பிறகு பிளேட்லெட் மீட்புடன் தொடர்புபடுத்தவில்லை. ஐரோப்பிய இரத்தம் மற்றும் மஜ்ஜை மாற்று குழுவில் (EBMT) சர்வதேச ஒத்துழைப்பில் செதுக்குதல் தோல்வியுற்ற நோயாளிகளின் குழுவில் முன்கணிப்பு மதிப்பின் எதிர்கால ஆய்வுகள் மதிப்பீடு செய்யப்பட வேண்டும்.