ஜர்னல் ஆஃப் பாக்டீரியாலஜி & பாராசிட்டாலஜி

சுருக்கம்

ரிவர்ஸ் டிரான்ஸ்கிரிப்ஷன் லூப்பைப் பயன்படுத்தி மனித ஜிகா வைரஸின் எளிய காட்சி கண்டறிதல் முறை

யாங் லி1,2, ஜென்சூ வான்3, யி ஸௌ2,4, சியா ஜின்5, ஹைஃபெங் ஷி1* மற்றும் சியு ஜாங் 2*

ஜிகா வைரஸ் (ZIKV) ஒரு வளர்ந்து வரும் கொசுக்களால் பரவும் நோய்க்கிருமியாகும், மேலும் இது ஃபிளவிவிரிடே குடும்பத்தைச் சேர்ந்தது, ஃபிளவிவைரஸ். ZIKV தொற்று மைக்ரோசெபாலி மற்றும் ஆண் மலட்டுத்தன்மையுடன் தொடர்புடையது. மனித இனப்பெருக்க ஆரோக்கியத்திற்கும், வைரஸ் பரவலைக் கட்டுப்படுத்துவதற்கும் ZIKA நோய்த்தொற்றின் கண்காணிப்பு முக்கியமானது. ZIKV கண்டறிதலுக்கான வேகமான மற்றும் உணர்திறன் மதிப்பீட்டை உருவாக்குவது சீனா மற்றும் பிற தென்கிழக்கு ஆசிய நாடுகளுக்கு அவசரமாக தேவைப்படுகிறது. இங்கே, ZIKV கண்டறிதலுக்கான ஒரு-படி, ஒற்றை-குழாய் தலைகீழ் டிரான்ஸ்கிரிப்ஷன் லூப்-மத்தியஸ்த சமவெப்ப பெருக்கம் (RT-LAMP) மதிப்பீட்டை நாங்கள் உருவாக்கியுள்ளோம். 25 μl எதிர்வினைக்கு ஜிகா ஆர்என்ஏவின் 88 நகல்களைக் கண்டறிவதற்கான வரம்பு (LOD) மதிப்பாய்வில் உள்ளது, மேலும் டெம்ப்ளேட் உள்ளீடு LOD ஐ விட அதிகமாக இருக்கும்போது 20 நிமிடங்களுக்குள் முடிக்க முடியும். மேலும், இது அதிக விவரக்குறிப்பு மற்றும் நல்ல இனப்பெருக்கம் ஆகியவற்றை வெளிப்படுத்துகிறது. முக்கியமாக, HNB அல்லது calcein ஐப் பயன்படுத்தும் போது, ​​வண்ண அளவீடு மாற்றம் மூலம் முடிவைக் காட்சிப்படுத்தலாம். மதிப்பீட்டின் நம்பகத்தன்மையை மதிப்பிடுவதற்கு, 20 செல் கலாச்சார சூப்பர்நேட்டண்டுகள் மற்றும் மூன்று சிறுநீர் மாதிரிகளைப் பயன்படுத்தி RT-LAMP மதிப்பீடு மற்றும் மிகவும் மாற்றமான RT-qPCR ஆகியவற்றுக்கு இடையேயான ஒப்பீடு செய்யப்பட்டது. ZIKV RT-LAMP ஆனது RT-qPCR உடன் கண்டறிவதில் சரியான உடன்பாட்டைக் காட்டியது. இந்த முடிவுகள் புதிதாக உருவாக்கப்பட்ட ZIKV RT-LAMP எளிமையானது, விரைவானது மற்றும் ZIKV கண்காணிப்புக்கு மிகவும் பொருத்தமானது என்பதை நிரூபிக்கிறது, குறிப்பாக வளங்கள் குறைவாக உள்ள பகுதிகளில்.