தாவர நோயியல் & நுண்ணுயிரியல் இதழ்

சுருக்கம்

உருளைக்கிழங்கு வைரஸ் Yஐ விரைவாகக் கண்டறிவதற்கான வண்ண அளவீட்டு இம்யூனோகேப்ச்சர் தலைகீழ் டிரான்ஸ்கிரிப்ஷன் லூப்-மத்தியஸ்த சமவெப்ப பெருக்க மதிப்பீடு

முகமது அமின் அல்மாசி மற்றும் செயத் முகமது ஹொசைனி தெஹபாடி

லூப்-மெடியேட்டட் ஐசோதெர்மல் ஆம்ப்ளிஃபிகேஷன் (LAMP) மதிப்பீடு என்பது நிலையான வெப்பநிலையின் கீழ் டிஎன்ஏவைப் பெருக்குவதற்கான ஒரு புதிய நுட்பமாகும். தலைகீழ் டிரான்ஸ்கிரிப்ஷன் பிசிஆர் (ஆர்டி-பிசிஆர்), ரிவர்ஸ் டிரான்ஸ்கிரிப்ஷன் லூப்-மெடியேட்டட் ஐசோதெர்மல் ஆம்ப்ளிஃபிகேஷன் (ஆர்டி-லேம்ப்) மற்றும் டிஏஎஸ்-எலிசாவை குறைந்தபட்ச அளவில், ஒரு புதுமையான கலர்மெட்ரிக் ஐசி-ஆர்டி-லேம்ப் உள்ளிட்ட சில கண்டறியும் மதிப்பீடுகளுக்குத் தேவையான நேரத்தைக் குறைக்கவும். உருளைக்கிழங்கு வைரஸ் Y (PVY) மரபணுவின் அடிப்படையில் IC-RT-PCR நெறிமுறை பயன்படுத்தப்பட்டது மற்றும் உகந்ததாக. முதலாவதாக, 95 சந்தேகத்திற்கிடமான மாதிரிகள் கொண்ட சேகரிப்பில் வைரஸைக் கண்டறிய DAS-ELISA மதிப்பீடு செய்யப்பட்டது. இறுதியாக, ஐந்து மாதிரிகள் நேர்மறை மாதிரிகள் என கண்டறியப்பட்டது. பின்னர், நேர்மறை மாதிரிகள் மூலக்கூறு முறைகள் மூலம் சரிபார்க்கப்பட்டன. இது சம்பந்தமாக, அனைத்து நான்கு RT-LAMP ப்ரைமர்களும் (அதாவது F3, B3, FIP மற்றும் BIP) RT-PCR ப்ரைமர்களுடன் (F மற்றும் B) PVY மரபணுவின் கோட் புரத மரபணுவின் (CP) அடிப்படையில் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்டன. DAS-ELISA, RT-PCR மற்றும் RT-LAMP மதிப்பீடுகள் நேர்மறை பாதிக்கப்பட்ட தாவர மாதிரிகளை வெற்றிகரமாக கண்டறிய முடியும் என்றாலும், நேரம், பாதுகாப்பு, உணர்திறன், செலவு மற்றும் எளிமை ஆகியவற்றைக் கருத்தில் கொண்டு, கடைசியானது ஒட்டுமொத்தமாக உயர்ந்ததாக இருந்தது. மேலும், RT-PCR உடன் ஒப்பிடும்போது RT-LAMP மதிப்பீடு 100 மடங்கு உணர்திறன் மற்றும் 3 மடங்கு வேகமானது என்பதை முடிவுகள் நிரூபித்துள்ளன. LAMP மதிப்பீடு எந்த வெப்ப சுழற்சி இயந்திரம் அல்லது அதிநவீன ஆய்வக வசதியிலிருந்தும் தண்ணீர் குளியல் மூலம் நிறைவேற்றப்பட்டது. இதற்கிடையில், IC-RT-LAMP தயாரிப்புகளை துல்லியமாகக் கண்டறியும் ஆறு வெவ்வேறு காட்சிச் சாயங்களில், ஹைட்ராக்ஸினாப்தால் நீலம், ஜீன்ஃபைண்டர் ^TM மற்றும் SYBR பச்சை ஆகியவை குறுக்கு-மாசு அபாயத்தைத் தடுக்க ஒரு நெருக்கமான குழாய் அடிப்படையிலான அணுகுமுறையில் நீண்ட நிலையான வண்ண மாற்றத்தையும் பிரகாசத்தையும் உருவாக்க முடியும், இறுதியில் முடிவுக்கு வந்தது. சிறந்தவர்களாக. அதன்படி, PVY அங்கீகாரம் மற்றும் பிற வைரஸ் சார்ந்த நோய்கள் தொடர்பான மிகவும் நம்பகமான மாற்று வைரஸ் அங்கீகார அமைப்பாக இந்த வண்ண அளவீட்டு மதிப்பீட்டை நாங்கள் முன்மொழிகிறோம்.