நுண்ணுயிர் & உயிர்வேதியியல் தொழில்நுட்ப இதழ்

சுருக்கம்

சில்லறை சிப்பி திசுக்களில் இருந்து பாக்டீரியா டிஎன்ஏவை தனிமைப்படுத்துவதற்கான வெவ்வேறு முறைகளின் ஒப்பீடு

கியான் ஜாங், மின் டாய், யான்ஹாங் லியு, மின் சோ, சியான்மிங் ஷி மற்றும் டாபெங் வாங்

சிப்பிகள் வடிகட்டி ஊட்டிகளாகும், அவை உணவளிக்கும் போது தண்ணீரில் பாக்டீரியாவைக் குவிக்கும். செவுள்கள் மற்றும் செரிமான சுரப்பிகள் உட்பட சில்லறை சிப்பி திசுக்களில் இருந்து பிரித்தெடுக்கப்பட்ட பாக்டீரியா மரபணு டிஎன்ஏவை மதிப்பிடுவதற்கு, நான்கு தனிமைப்படுத்தும் முறைகள் பயன்படுத்தப்பட்டன. Allmag™ Blood Genomic DNA (Allrun, Shanghai, China), MiniBEST பாக்டீரியா ஜீனோமிக் DNA பிரித்தெடுக்கும் கருவிகள் (Takara, Dalian, China) மற்றும் பீனால்-குளோரோஃபார்ம் மற்றும் கொதிக்கும் சிதைவு முறைகளைப் பயன்படுத்தி மரபணு DNA பிரித்தெடுத்தல் செய்யப்பட்டது. ஸ்பெக்ட்ரோஃபோட்டோமீட்டரைப் பயன்படுத்தி மரபணு டிஎன்ஏவின் செறிவு அளவிடப்பட்டது. மரபணு DNAவின் தூய்மை 16S rDNA இன் PCR பெருக்கத்தின் மூலம் மதிப்பிடப்பட்டது, அதைத் தொடர்ந்து ஆம்ப்ளிகானின் குளோனிங் திறனை pMD19-T வெக்டரில் தீர்மானிக்கிறது. மேலும், விப்ரியோ பாராஹேமோலிட்டிகஸுக்கு ஒரு ஜோடி இனங்கள்-குறிப்பிட்ட ப்ரைமர்களைப் பயன்படுத்தி பிசிஆர் மதிப்பீடுகளால் பாக்டீரியாவின் டிஎன்ஏ தரமும் மதிப்பிடப்பட்டது. எங்கள் முடிவுகள் இரண்டு வணிகக் கருவிகளும் டிஎன்ஏவின் மிக உயர்ந்த தூய்மையை உருவாக்குகின்றன, ஆனால் குறைந்த விளைச்சலைக் கொண்டுள்ளன. ஃபீனால்-குளோரோஃபார்ம் முறை அதிக மகசூலைக் கொடுத்தது, இருப்பினும் அது நேரத்தைச் சாப்பிடும். கொதிக்கும் லிசிஸ் முறை எளிமையானது மற்றும் செலவு குறைந்ததாக இருந்தது; இருப்பினும், செறிவூட்டல் படியைத் தொடர்ந்து சில்லறை மாதிரிகளில் இருக்கும் பாக்டீரியாவிலிருந்து மரபணு டிஎன்ஏவை தனிமைப்படுத்த மட்டுமே பொருத்தமானது. இரண்டு வணிகக் கருவிகளும் செறிவூட்டல் இல்லாமல் சில்லறை சிப்பி திசுக்களில் இருந்து மரபணு DNA பிரித்தெடுப்பதற்கான நல்ல வேட்பாளர்களாக இருந்தன.