பயோமோலிகுலர் ரிசர்ச் & தெரபியூட்டிக்ஸ் ஜர்னல்

சுருக்கம்

N-Hydroxysulfosuccinimide இணைக்கப்பட்ட பயோட்டின் ரீஜென்ட் மூலம் ஆஞ்சியோடென்சின் II இன் சிக்கலான அசைலேஷன்

Qinfeng Liu, Andres Lam மற்றும் Achyut Kathuria

N-Hydroxysulfosuccinimide-இணைக்கப்பட்ட பயோட்டின்கள் (sulfoNHS-biotins) நீரில் கரையக்கூடிய பயோட்டின் குறிச்சொற்கள் பொதுவாக முதன்மை அமின்களின் விரைவான N- அசைலேஷன் மூலம் புரதங்களுடன் பயோட்டின் பகுதியை இணைக்கப் பயன்படுகிறது. ஆஞ்சியோடென்சின் II (Ag-II) இன் டைரோசினில் சல்போஎன்ஹெச்எஸ்பியோட்டின் மூலம் எதிர்பாராத O-அசைலேஷன் மற்றும் மூன்றாவது தளத்தில் அசைலேஷன் ஆகியவை LC-MS ஆல் அடையாளம் காணப்பட்டது. N-அசைலேஷன் 0.1% ஃபார்மிக் அமிலத்தில் pH 7.2 மற்றும் 8.0 இல் முழுமையடையாத நீராற்பகுப்புக்கு உட்படுகிறது, அதே நேரத்தில் இரண்டு எதிர்பாராத அசைலேஷன் ஹைட்ரோலைஸ் இரண்டு நிலைகளிலும், ஆனால் 0.1% ஃபார்மிக் அமிலத்தில் அவற்றின் நீராற்பகுப்பு மிக வேகமாக இருந்தது. டிதியோத்ரீடோல் சிகிச்சையானது எதிர்பாராத அசைலேஷன் இரண்டின் நீராற்பகுப்புகளைத் தேர்ந்தெடுத்து வினையூக்கியது ஆனால் Ag-II இன் N- அசைலேஷன் அல்ல. 94% pH 7.2 மற்றும் 96 இல் இந்த விளைச்சலுடன் 94% அதிக சல்போNHS-பயோட்டினுடன் வினைபுரியும் போது லைசினின் N- அசைலேஷன் ஒப்பிடும்போது, ​​Ag-II டைரோசினின் O-அசைலேஷனின் அதிகபட்ச மகசூல் pH 7.2 இல் 99% ஆகவும், pH 8.0 இல் 95% ஆகவும் இருந்தது. pH 8.0 இல் %. Ag-II இன் மூன்றாவது குறிப்பிடப்படாத தளத்தின் அசைலேஷன் pH 7.2 இல் தோராயமாக 17% அதிகபட்ச மகசூலைக் காட்டியது, ஆனால் 30 நிமிடங்களுக்குள் pH 8.0 இல் அதிக மகசூல் (≥ 47%). Ag-II டைரோசினின் எதிர்பாராத O-அசைலேஷன் 1 நிமிடத்திற்குள் pH 7.2 அல்லது pH 8.0 இல் நிகழ்ந்தது, N-அசைலேஷன் போலவே விரைவாகவும், மற்ற எதிர்பாராத அசைலேஷன் pH 8.0 இல் முடிக்க அதிக நேரம் தேவைப்பட்டது.