உயிர் வேதியியல் & பகுப்பாய்வு உயிர்வேதியியல்

சுருக்கம்

ராமன் ஸ்பெக்ட்ரோஸ்கோபி மூலம் மதிப்பிடப்பட்ட இரட்டை இழை DNA சேதம்

Auner AW மற்றும் தாமஸ் JC

இரட்டைப் பின்னப்பட்ட டிஎன்ஏ முறிவுகள் [டிஎஸ்பிகள்] மற்றும் அடுத்தடுத்த பழுது டிஎன்ஏ சேதத்தை சரிசெய்யலாம் அல்லது தவறாக உயிரணு சேதம் மற்றும் நோய்க்கு வழிவகுக்கும் பிறழ்வுகளை ஏற்படுத்தலாம். DSBகளை ராமன் ஸ்பெக்ட்ரோஸ்கோபி மூலம் அளவிடலாம் , சுத்திகரிக்கப்பட்ட டிஎன்ஏ மாதிரிகளிலிருந்து தனித்துவமான மூலக்கூறு அதிர்வுகளின் விளைவாக ஏற்படும் நெகிழ்ச்சியற்ற சிதறிய ஒளியைப் பயன்படுத்தி அளவிட முடியும். 20 வினாடிகள் மற்றும் 2 குவிப்புகளின் வெளிப்பாடு நேரத்துடன், ராமன் பகுப்பாய்வு வட்ட pBS KS+ பிளாஸ்மிட் டிஎன்ஏ அதிர்வுகள் நீர் வெற்றுக் கட்டுப்பாட்டைப் போலவே இருப்பதைக் கண்டறிந்தது. pBS KS+ ஒற்றை EcoR1 தளத்தின் கட்டுப்பாடு நேரியல் டிஎன்ஏவை உருவாக்கியது மற்றும் 880, 1044, 1084 மற்றும் 1458 செமீ ^-1 இல் ராமன் சிகரங்களில் குறிப்பிடத்தக்க அதிகரிப்புகளை உருவாக்கியது . டிஎன்ஏ சேதத்தை ராமன் கண்டறிவதை மேலும் ஆராய, மனித ஜுர்காட் லிம்போசைட்டுகள் +/- 16 μg/ml Bleocin™ இல் வளர்க்கப்பட்டன. Bleocin ^{™ சிகிச்சை உயிரணுக்களின் DNA ஆனது 880, 1044, 1084, மற்றும் 1458 cm -1} மற்றும் சிகிச்சை அளிக்கப்படாத செல்கள் ஆகியவற்றில் மேம்படுத்தப்பட்ட ராமன் உறிஞ்சுதலை நிரூபித்தது . ஜுர்காட் செல்கள் சார்பு-அபோப்டோடிக் பாக்ஸ் புரதம் மற்றும் p53 ஐ வெளிப்படுத்தும் திறனில் குறைபாடுடையது, ஆனால் Bleocin ^™ வெளிப்பாடு TAp73 அளவை அதிகரித்தது, அதன்பின் செல் இறப்பு. உயிரியல் பொருட்களில் குறைந்த குறுக்கீடு மற்றும் அதிக உணர்திறன் காரணமாக, ராமன் ஸ்பெக்ட்ரோஸ்கோபி என்பது தொடர்புடைய DSBகளின் அளவை ஒப்பீட்டளவில் மதிப்பிடுவதற்கான விரைவான மற்றும் எளிமையான முறையாகும். உயிருள்ள மற்றும் இறக்கும் உயிரணுக்களின் பகுப்பாய்வு தேவைப்படும் வால்மீன் மதிப்பீடுகளைப் போலன்றி, தனிமைப்படுத்தப்பட்ட டிஎன்ஏவை எந்த உயிரணுவிலிருந்தும் எளிதாக மீட்டெடுக்க முடியும், சேமிக்கப்பட்டு, பின்னர் DSB பகுப்பாய்வு செய்யப்படுகிறது.