நுண்ணுயிர் & உயிர்வேதியியல் தொழில்நுட்ப இதழ்

சுருக்கம்

எஸ்கேரிச்சியா கோலியில் SAK-இணைந்த மனித இண்டர்ஃபெரான் ஆல்பாவின் வெளிப்பாடு மற்றும் சுத்திகரிப்பு

ஷர்துல் சாலுங்கே, பாஸ்கர்ஜோதி பிரசாத், கேதகி சப்னிஸ்-பிரசாத், அஞ்சலி ஆப்தே-தேஷ்பாண்டே மற்றும் ஸ்ரீராம் பத்மநாபன்

மனித இண்டர்ஃபெரான் பெறப்பட்ட ஈ.கோலை மேம்படுத்தப்பட்ட மறு மடிப்பு மற்றும் சுத்திகரிப்புக்கான ஒரு முறை -? (rhIFN ?2b) ஒரு ஸ்டேஃபிளோகினேஸ் (SAK) இணைவு புரதமாக உள்ளடக்கிய உடல்களில் இருந்து விவரிக்கப்பட்டுள்ளது. இத்தகைய இணைவு புரதம் வெளிப்பாட்டிற்கு அரிதான கோடான்களின் கூடுதல் தேவை இல்லை மற்றும் 37?C இல் நிலையாக இருப்பது கண்டறியப்பட்டது. மறுமடிப்புக்கான உகந்த நிலைமைகள், திரட்டலைத் தடுக்க வேறு எந்த முகவர்களும் தேவையில்லாமல் லேசான டினாடரேட்டிங் முகவரைப் பயன்படுத்துவதை உள்ளடக்கியது. SAKrhIFN ?2b இணைவு புரதம் இரண்டு படி சுத்திகரிப்பு மூலம் வெற்றிகரமாக சுத்திகரிக்கப்பட்டது மற்றும் என்டோரோகினேஸைப் பயன்படுத்தி SAK மற்றும் IFN என இரண்டு துண்டுகளாக பிரிக்கப்பட்டது. இரண்டு புரதங்களும் உயிரியல் ரீதியாக செயலில் இருப்பது கண்டறியப்பட்டது, இரு இணைவு கூட்டாளர்களின் சரியான மடிப்பைக் காட்டுகிறது. க்ளீவ்டு IFN ஆனது RP-HPLC இல் பாக்டீரியல் பெறப்பட்ட குறியிடப்படாத சுத்திகரிக்கப்பட்ட IFN மற்றும் அஜிலன்ட் 2100 பயோஅனாலைசரில் உள்ள ஒத்த மூலக்கூறு எடையைப் போலவே என்டோரோகினேஸ் பிளவுக்குப் பிறகு IFN இன் சரியான செயலாக்கத்தைக் குறிக்கிறது. SAK-IFN இன் வெளிப்பாடு நிலைகள் இதேபோன்ற சோதனை நிலைமைகளின் கீழ் குறியிடப்படாத IFN உடன் காணப்பட்டதை விட இரண்டு மடங்கு அதிகமாக இருப்பது கண்டறியப்பட்டது.