நுண்ணுயிர் & உயிர்வேதியியல் தொழில்நுட்ப இதழ்

சுருக்கம்

மெத்திலோட்ரோபிக் ஈஸ்ட் பிச்சியா பாஸ்டோரிஸில் ஒரு கோடான்-உகந்த காரிகா பப்பாளி பாப்பைன் வரிசையின் வெளிப்பாடு

நிக்கோல் வெர்னர், தாமஸ் ஹிர்த், ஸ்டெஃபென் ரூப் மற்றும் சுசன்னே ஜிபெக்

சிஸ்டைன் எண்டோபுரோட்டீஸ் பாப்பைன் என்பது தொழில்துறை பயன்பாடுகளுக்கு மிகவும் பரவலாகப் பயன்படுத்தப்படும் தாவர புரதங்களில் ஒன்றாகும். இருப்பினும், பப்பாளிச் செடிகளின் மரப்பால் இருந்து பாப்பேன் என்ற பாரம்பரிய தனிமைப்படுத்தல் உலகம் முழுவதையும் மறைக்க முடியாதா? கோரிக்கை. தொழில்துறை பயன்பாடுகளுக்கான பாப்பைன் உற்பத்தியை அதிகரிக்க, அதன் மறுசீரமைப்பு உற்பத்திக்காக கடந்த ஆண்டுகளில் பல வெளிப்பாடு அமைப்புகள் ஆய்வு செய்யப்பட்டன. Eschericha coli இன் வெளிப்பாடு கரையாத புரதத்தின் திரட்சியை விளைவித்தாலும், பாகுலோவைரஸ்/பூச்சி அமைப்பு மற்றும் Saccharomyes cerevisiae ஆகியவற்றின் வெளிப்பாடு பெரிய அளவிலான உற்பத்திக்கு போதுமானதாக இல்லாத கரையக்கூடிய புரதத்தின் குறைந்த விளைச்சலை ஏற்படுத்தியது. பிச்சியா பாஸ்டோரிஸ் விகாரங்கள் X33 (Mut+) மற்றும் KM71H (Muts) ஆகியவற்றில் செயற்கை கோடான்-உகந்த புரோபபைன் வரிசையின் பன்முக வெளிப்பாட்டை இங்கே விவரிக்கிறோம். மறுசீரமைப்பு ப்ரோபாபைன் கரையக்கூடிய புரதமாக வெளிப்படுத்தப்படலாம் மற்றும் α-காரணி சமிக்ஞை பெப்டைட் மூலம் கலாச்சார ஊடகத்தில் சுரக்கப்படும். சிக்கலான ஊடகத்தில் பயிரிடப்படும் போது மட்ஸ் விகாரத்தில் மிக உயர்ந்த செயல்பாடுகள் பெறப்பட்டன. Ni-NTA குரோமடோகிராபி மூலம் சுத்திகரிக்கப்பட்ட பிறகு 463 mg/L மறுசீரமைப்பு புரோபபைன் ஈ.கோலியில் புரதக் கரைதிறன் மற்றும் மறுமடிப்பு மற்றும் பப்பாளி லேடெக்ஸில் இருந்து ஒரு வணிகப் பாப்பைன் போன்ற ஒரு குறிப்பிட்ட செயல்பாட்டிற்குப் பிறகு இதுவரை அதிகமாகப் புகாரளிக்கப்பட்ட ப்ராபபைன் விளைச்சலுடன் ஒப்பிடத்தக்கது.