Single Cell Biology

சுருக்கம்

கோசிபியம் ஹிர்சுட்டம் குரோமோசோம் மாற்றுக் கோடுகளிலிருந்து தனித்தனியாக தனிமைப்படுத்தப்பட்ட கேமட்களின் மரபணு வகைப்படுத்தல்

அஹ்மத் நசீர் அஜீஸ்*, அப்துல் முஜீத் யாகுபு மற்றும் ஷெர்யா சிங் ஹமால்

அமெரிக்க விவசாய பாதுகாப்பு மற்றும் நிலையான விவசாயத்திற்கான ஒரு முக்கிய பயிராக, பருத்தி மரபணு மேம்பாட்டிற்கு புதுமையான பகுப்பாய்வுக் கருவிகளின் வளர்ச்சி தேவைப்படுகிறது. தனிப்பட்ட கேமட்களை அடிப்படையாகக் கொண்ட மரபணு பகுப்பாய்வுகள் குறைந்தபட்ச மாதிரி தேவை, ஆண் பெற்றோரின் மரபணு அடையாளம் மற்றும் மைக்ரோஸ்போர்களின் ஹாப்லாய்டு தன்மை காரணமாக பாலிப்ளோயிடியின் சிக்கலான தன்மையை சமாளிப்பது உள்ளிட்ட பல நன்மைகளை வழங்குகிறது. இந்த ஆராய்ச்சியானது ஜி. ஹிர்சுட்டம் பின்னணியில் ஜி. பார்படென்ஸ் குரோமோசோம்கள் 17 மற்றும் 25 உடன் டெட்ராப்ளோயிட் பருத்தி (ஜி. ஹிர்சுட்டம் x ஜி. பார்படென்ஸ்) குரோமோசோம் மாற்று (சிஎஸ்) கோடுகளைப் பயன்படுத்தியது. தனித்தனியாக தனிமைப்படுத்தப்பட்ட மகரந்தத் துகள்கள் அவற்றின் டிஎன்ஏக்களை வெளியிட முளைத்தன மற்றும் மாஸ்டர்ஆம்ப்™ எக்ஸ்ட்ரா-லாங் பிசிஆர் கிட் (EPICENTRE®, மேடிசன், WI) ஐப் பயன்படுத்தி மாற்றியமைக்கப்பட்ட ப்ரைமர் நீட்டிப்பு முன்-பெருக்கம் (PEP) மூலம் மரபணு DNA அதிகரிக்கப்பட்டது. தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட பருத்திக் கோடுகளிலிருந்து, டெட்ராட் வளர்ச்சி நிலையில் இருந்து வெளியிடப்பட்ட மைக்ரோஸ்போர்கள் தனித்தனியாக தனிமைப்படுத்தப்பட்டு, கேமட் டிஎன்ஏ பிரித்தெடுக்கப்பட்டது மற்றும் REPLI-g சிங்கிள் செல் கிட் (QIAGEN, Valencia, CA) ஐப் பயன்படுத்தி பல இடப்பெயர்ச்சி பெருக்கம் (MDA) மூலம் பெருக்கப்பட்டது. PEP மற்றும் MDA பெருக்கப்பட்ட தனிப்பட்ட கேமட் டிஎன்ஏக்களுடன் பெற்றோரின் மாதிரிகள் பின்னர் எளிய வரிசை மீண்டும் (SSR) மற்றும் IRD800 மற்றும் IRD-700 என பெயரிடப்பட்ட (Li-Cor, Lincoln, NE) பெருக்கப்பட்ட துண்டு நீள பாலிமார்பிசம் (AFLP) முறைகளைப் பயன்படுத்தி பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டன. TM-1, 3-79, CS-B17 மற்றும் CS-B25 பருத்தி வரிகளை பகுப்பாய்வு செய்ய பத்தொன்பது SSR மற்றும் 28 AFLP ப்ரைமர் ஜோடிகள் பயன்படுத்தப்பட்டன. முதிர்ந்த மகரந்தம் மற்றும் ஆரம்பகால இலவச மைக்ரோஸ்போர் மாதிரிகள் இரண்டிலிருந்தும் பெற்றோரின் SSR மற்றும் AFLP குறிப்பான்களின் பெருக்கம் முறையே அகரோஸ் மற்றும் பாலிஅக்ரிலாமைடு ஜெல் எலக்ட்ரோபோரேசிஸைப் பயன்படுத்தி ஒப்பீட்டு மரபணு ஆய்வுகளுக்கு தனித்துவமான கருவிகளை வழங்கியது.