உயிர் வேதியியல் & பகுப்பாய்வு உயிர்வேதியியல்

சுருக்கம்

கல்லீரல் ஸ்கேவெஞ்சர் ஏற்பிகளால் ஹெப்பரின் கிளியரன்ஸ்

எட்வர்ட் என். ஹாரிஸ்

GPCR களில் செயல்படும் வெற்றி அல்லது ஈய கலவைகளை அடையாளம் காண, HTS ஆய்வகங்களில் பிணைப்பு மற்றும் சமிக்ஞைக்கான மதிப்பீட்டு தொழில்நுட்பங்களின் வரம்பு உருவாக்கப்பட்டுள்ளது. [35S] GTPγS பிணைப்பு மதிப்பீடு இன்னும் ஒரு பயனுள்ள மற்றும் எளிமையான நுட்பமாக உள்ளது, இது ஏற்பி செயல்படுத்தலை நிரூபிக்கிறது மற்றும் சில செயல்பாட்டு, செல்-இலவச மதிப்பீடுகளில் ஒன்றாகும். இருப்பினும், அதன் கதிரியக்க இயல்பு வழக்கமான ஆய்வக நடைமுறையிலும் உயர்-செயல்திறன் சோதனைகளிலும் அதன் பயன்பாட்டிற்கு தெளிவான வரம்புகளை விதிக்கிறது. இங்கே, யூரோபியம்-லேபிளிடப்பட்ட ஜிடிபி அனலாக்ஸைப் பயன்படுத்தி மதிப்பீட்டின் புதிய கதிரியக்கமற்ற பதிப்பை உருவாக்கியுள்ளோம், இதில் யூரோபியம்-ஜிடிபி பிணைப்பை நேர-தீர்மான ஃப்ளோரசன்ஸைப் பயன்படுத்தி மதிப்பீடு செய்யலாம். எங்கள் முயற்சிகளின் தொடர்ச்சியாக, இந்த மதிப்பீடு ஹிஸ்டமைன் 3 ஏற்பிகளுக்கு ஏற்றது. அறியப்பட்ட ஹிஸ்டமைன் 3 அகோனிஸ்டுகள் (Imetit, Immepip, Methylhistamine, Proxifan மற்றும் Histamine) மற்றும் எதிரிகள் (GSK189254, Clobenpropit மற்றும் Thioperamide) மருந்துகளை பரிசோதிப்பதன் மூலம் மதிப்பீட்டு வடிவம் குறிப்பாக மதிப்பிடப்பட்டது. உகந்த மதிப்பீட்டு நிலைமைகளின் கீழ், பிணைப்பு மதிப்பீட்டில் உள்ள ஆற்றல்கள் (pEC50 & PKB) ஐசோடோபிக் செயல்பாட்டு செயல்பாட்டு மதிப்பீட்டில் முன்பு பெறப்பட்டவற்றுடன் நல்ல உடன்பாட்டில் உள்ளன. Eu-GTP பிணைப்பு மதிப்பீடு மிகவும் வலுவானதாக (Z' காரணி 0.84) அடிப்படை எண்ணிக்கையை விட அதிக சதவீதத்துடன் காணப்பட்டது. ஹிஸ்டமைன் 3 ஏற்பி எதிரிகளின் திரையிடலுக்கான ஸ்கிரீனிங் அடுக்கின் ஒரு அங்கமாக இந்த மதிப்பீடு பயன்படுத்தப்படலாம்.