ஸ்டெம் செல் ஆராய்ச்சி மற்றும் சிகிச்சை இதழ்

சுருக்கம்

முரைன் இன்டர்சோன் செல்களின் லேசர் பிடிப்பு நுண்ணுயிரி: லேயர் தேர்வு மற்றும் ஆர்என்ஏ விளைச்சலின் கணிப்பு

ஃப்ளோரியன் ஜென்னர், கெர்ஜோ ஜேவிஎம் வான் ஓஷ், மைரேட் கிளியரி, ஐரிஸ் ரிபிட்ச், உல்ரிச் சாயர், ரெனே வான் வீரன் மற்றும் பீட்டர் பிராமா

குறிக்கோள்: மூட்டு காண்டிரோசைட்டுகள் கரு வளரும் மூட்டுகளில் உள்ள இன்டர்சோன் என்று அழைக்கப்படும் பிறவி உயிரணுக்களின் தனித்துவமான கூட்டிலிருந்து உருவாகின்றன. இந்த ஆய்வை நாங்கள் நடத்தினோம் 1) இடைநிலை மற்றும் வெளிப்புற இடை மண்டல அடுக்குகளை ஹிஸ்டோலாஜிக்கல் முறையில் (கிரெசில் வயலட்டைப் பயன்படுத்தி) சிட்டு ஹைப்ரிடைசேஷன் அல்லது இம்யூனோஹிஸ்டோ கெமிஸ்ட்ரியில் இணைப்பில்லாமல் அடையாளம் காண முடியுமா என்பதைத் தீர்மானிக்க; 2) மரபணு வெளிப்பாடு பகுப்பாய்வை அனுமதிக்க தனிப்பட்ட கருக்களின் ஒவ்வொரு இடை மண்டல அடுக்கிலிருந்தும் போதுமான அளவு ஆர்என்ஏவை அறுவடை செய்ய முடியுமா என்பதை நிறுவுதல்; 3) விலையுயர்ந்த பெருக்க நடவடிக்கைகளுக்கு முன் RNA விளைச்சலின் மதிப்பீட்டை வழங்கக்கூடிய அளவீடுகளை உருவாக்குதல். முறைகள்: 13.5 மற்றும் 15.5 நாட்கள் கர்ப்பகாலத்தின் முரைன் கருக்களின் தொடை எலும்பு மற்றும் கால் முன்னெலும்பின் எபிஃபைசல் குருத்தெலும்பு (EC) மற்றும் வெளிப்புற (OI) மற்றும் இடைநிலை (II) இடை மண்டலத்திலிருந்து வரும் செல்கள் லேசர் கேப்சர் மைக்ரோடிசெக்ஷனைப் பயன்படுத்தி அறுவடை செய்யப்பட்டன. பின்னர், பொருத்தமான அடுக்கு தேர்வை உறுதிப்படுத்த மைக்ரோஅரே பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டது. அறுவடை செய்யப்பட்ட மேற்பரப்பு மற்றும் LCM இன் போது எடுக்கப்பட்ட ஃபோட்டோமிக்ரோகிராஃப்களின் சாம்பல் மதிப்பு (gv) அளவிடப்பட்டது மற்றும் தொடர்புடைய ஒளியியல் அடர்த்தி (ROD) கணக்கிடப்பட்டது மற்றும் RNA விளைச்சலுடன் உள்ள தொடர்பின் அளவு மற்றும் முக்கியத்துவம் தீர்மானிக்கப்பட்டது. முடிவுகள்: OI, II மற்றும் EC இலிருந்து செல்கள் க்ரெசில் வயலட் ஸ்டைனிங்கைப் பயன்படுத்தி ஹிஸ்டோலாஜிக்கல் முறையில் அடையாளம் காணப்படலாம் மற்றும் நேரியல் பெருக்கம் மற்றும் மைக்ரோஅரே பகுப்பாய்விற்கு போதுமான அளவு ஆர்என்ஏவை வழங்கும் LCM மூலம் வெற்றிகரமாக அறுவடை செய்யப்பட்டது. ஆர்என்ஏ மகசூல் அறுவடை செய்யப்பட்ட திசு மேற்பரப்பு பகுதி, சராசரி ஜிவி மற்றும் தொடர்புடைய ROD ஆகியவற்றுடன் கணிசமாக தொடர்புடையது. முடிவுகள்: இந்த ஆய்வு தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட லேசர் பிடிப்பு நுண்ணுயிர்ப் பிரிப்புக்கான நுட்பத்தை வழங்குகிறது மற்றும் இடைநிலை மற்றும் வெளிப்புற அடுக்குகளின் முரைன் இன்டர்சோன் செல்களின் மைக்ரோஅரே பகுப்பாய்வு மற்றும் அறுவடை செய்யப்பட்ட திசு பகுதியை அளந்து ROD ஐ கணக்கிடுவதன் மூலம் RNA விளைச்சலை மதிப்பிடுவதற்கான ஒரு முறையை வழங்குகிறது. தோராயமாக 10 ng மொத்த ஆர்என்ஏவைப் பெற, 13.5 நாள் முரைன் கருக்களில் குறைந்தபட்சம் 1×106 μm2 மற்றும் 15.5 நாள் முரைன் கருக்களில் 3×106 μm2 அறுவடை செய்ய பரிந்துரைக்கிறோம், அவை நேரியல் T7-அடிப்படையிலான பெருக்கம் மற்றும் அடுத்தடுத்த மைக்ரோஅரே பகுப்பாய்விற்குப் பயன்படுத்தப்படலாம்.