மருத்துவ மற்றும் மருத்துவ உயிர்வேதியியல்

சுருக்கம்

ஆங்காங்கே மார்பகப் புற்றுநோயில் RASSF1 ஜீன் மெத்திலேஷன் மற்றும் mRNA வெளிப்பாடு ஆகியவற்றின் மூலக்கூறு பகுப்பாய்வு

மரியா லாகியோ, நிகோலெட்டா பூம்பூரிடோ, நிகோலாஸ் கௌடாஸ், டிமிட்ரியோஸ் விலாச்சோடிமிட்ரோபொலோஸ், அகெலிகி பாப்பா, எவி லியானிடோ, ட்ரையான்டாஃபிலோஸ் லிலோக்லோ மற்றும் கிறிஸ்டோஸ் குரூபிஸ்

அறிமுகம்: இந்த ஆய்வின் நோக்கம் RASSF1 மரபணுவின் முதல் ஊக்குவிப்பாளரின் டிஎன்ஏ மெத்திலேஷன் (மார்பக திசுக்களில் அதன் முதன்மை டிரான்ஸ்கிரிப்ட் RASSF1A படியெடுத்தல்), அதன் எம்ஆர்என்ஏ வெளிப்பாடு மற்றும் அவ்வப்போது மார்பக புற்றுநோயில் அவற்றின் மதிப்பீடு ஆகியவற்றை ஆய்வு செய்வதற்கான புதுமையான மற்றும் நம்பகமான முறைகளை சரிபார்ப்பதாகும். பொருட்கள் மற்றும் முறைகள்: 81 உறைந்த மார்பக புற்றுநோய் திசுக்களில் இருந்து டிஎன்ஏ மற்றும் ஆர்என்ஏ ஆகியவை அறியப்பட்ட ஹிஸ்டோபோதாலஜிக்கல் தரவு மற்றும் 4 சாதாரண மார்பக திசுக்கள் பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டன. முதல் RASSF1 ஊக்குவிப்பாளரின் CpG தீவில் 9 CpG டைனுக்ளியோடைட்களை பகுப்பாய்வு செய்து, பைரோசென்சிங் மூலம் DNA மெத்திலேஷன் அளவுகள் மதிப்பிடப்பட்டன. mRNA வெளிப்பாட்டிற்கு, SYBR Green PCR கிட் மற்றும் அனைத்து RASSF1 டிரான்ஸ்கிரிப்ட் மாறுபாடுகளுக்கும் (G தவிர) தரப்படுத்தப்பட்ட ப்ரைமர்களின் (Qiagen) பொருத்தமான தொகுப்புடன், நிகழ்நேர RT-qPCR முறை பயன்படுத்தப்பட்டது மற்றும் செயற்கைத் தரங்களுடன் சரிபார்க்கப்பட்டது. RASSF1 வெளிப்பாட்டின் ஒப்பீட்டு அளவீட்டிற்கு, 2-ΔCt முறையானது பீட்டா2-மைக்ரோகுளோபுலின் ஒரு குறிப்பு மரபணுவாகப் பயன்படுத்தப்பட்டது. முடிவுகள்: 59 மாதிரிகள் RASSF1 சாதாரணமாக-மெத்திலேட்டட் (72.8%), 22 மாதிரிகள் ஹைப்பர்மீதிலேட்டட் (27.2%) என வகைப்படுத்தப்பட்டன. மேலும், 40 மாதிரிகள் RASSF1 mRNA ஓவர்-எக்ஸ்பிரஸிங் (49.4%), அதே சமயம் 41 (50.6%) துணை வெளிப்பாடு என வகைப்படுத்தப்பட்டுள்ளன. மெத்திலேஷன் மற்றும் RASSF1 வெளிப்பாடு (p=0.207) இடையே தலைகீழ் தொடர்பு எதுவும் காணப்படவில்லை. நெகடிவ் ஈஆர் ஏற்பிகள் (p=0.008, OR 0.09, CI 0.14-0.52), மெத்திலேஷன் சதவீதம் (p=0.006, OR 7.96, CI 1.86) -34.86 மற்றும் RASSF1 வெளிப்பாட்டின் நிலை (p=0.047, OR 3.94, CI 1.02-15.29). மெட்டாஸ்டாசிஸ் மற்றும் mRNA RASSF1 ஓவர்-எக்ஸ்பிரஷன் (பதிவு தரவரிசை சோதனை, p=0.040) ஆகியவற்றுக்கு இடையே ஒரு சிறிய புள்ளியியல் ரீதியாக குறிப்பிடத்தக்க தொடர்பு இருப்பதாக சர்வைவல் பகுப்பாய்வு காட்டுகிறது. முடிவுகள்: மதிப்பிடப்பட்ட மதிப்பீடுகள் மார்பகப் புற்றுநோய்களின் மருத்துவ மேலாண்மைக்கு பயனுள்ள தகவல்களை வழங்குவதாகத் தோன்றுகிறது. இரண்டாவது RASSF1 ஊக்குவிப்பாளரின் மெத்திலேஷனுக்கான இதேபோன்ற நம்பகமான மதிப்பீடு எதிர்காலத்தில் மதிப்பீடு செய்யப்பட வேண்டும். வெளிப்பாடு ஆய்வைப் பொறுத்தவரை, அனைத்து வெவ்வேறு RASSF1 டிரான்ஸ்கிரிப்டுகளுக்கும் குறிப்பிட்ட ஆய்வுகள் கொண்ட ஒரு புதிய வடிவமைப்பு உத்தி, ஆய்வில் கூடுதல் சக்தியை வழங்கும் மற்றும் ஆங்காங்கே மார்பக புற்றுநோயின் மருத்துவ மதிப்பீட்டில் புதிய RASSF1 பயோமார்க்ஸர்களைப் பயன்படுத்துவதை சாத்தியமாக்குகிறது.