Single Cell Biology

சுருக்கம்

செயல்பாட்டு சோதனைகள் மூலம் பிறழ்வுகளை பகுப்பாய்வு செய்வதற்கான முக்கியத்துவத்தின் CFTR இன் ஒற்றை மாற்றத்தின் பல-செயல்பாட்டு விளைவுகள்

லாடெவெஸ் வி, ஃபர்ஹத் ஆர், எல் சீடி ஏ மற்றும் கிட்ஸிஸ் ஏ

சிஸ்டிக் ஃபைப்ரோஸிஸ் என்பது காகசியன் மக்களில் மிகவும் பொதுவான அரிதான நோயாகும். இந்த கடுமையான பரம்பரை பின்னடைவு நோய் சிஸ்டிக் ஃபைப்ரோஸிஸ் டிரான்ஸ்மெம்பிரேன் கண்டக்டன்ஸ் ரெகுலேட்டர் (CFTR) மரபணுவில் ஏற்படும் பிறழ்வுகளால் ஏற்படுகிறது. இந்த மரபணு எபிடெலியல் செல்களின் நுனி மென்படலத்தில் வெளிப்படுத்தப்படும் புரதத்தை குறியாக்குகிறது. பிறழ்வுகள் அவற்றின் விளைவுகள் மற்றும் பினோடைப் தீவிரத்தின் அடிப்படையில் ஆறு வகுப்புகளாக வகைப்படுத்தப்படுகின்றன. F508delmutation என்பது CFTR மரபணுவின் அடிக்கடி ஏற்படும் மாற்றமாகும்; இது புரதத்தின் தவறான மடிப்பைத் தூண்டுகிறது, இதனால் அதன் முதிர்ச்சி, சவ்வு பரவல் மற்றும் இறுதியில் அதன் செயல்பாடு ஆகியவற்றைத் தடுக்கிறது.

இந்த ஆய்வானது c.1392G>T (p.Lys464Asn) CFTR எக்ஸான் 10 பிறழ்வின் உடலியல் விளைவுகளைத் தீர்மானிக்க மருத்துவ அணுகுமுறை மற்றும் பல நிலை செல்லுலார் பகுப்பாய்வுகளை ஒருங்கிணைக்கிறது, இது ஒரு CF நோயாளிக்கு டிரான்ஸ் மற்றும் TG(11111 இல் சட்ட மாற்றத்தை நீக்குகிறது. cis இல் T(5) முதலில், வெவ்வேறு TG(m)T(n) அல்லீல்கள் மற்றும் c.1392G>T இன் விளைவுகளைத் தீர்மானிக்க நாசி செல் mRNA சாற்றுடன் மினிஜீன் சோதனைகள் மூலம் பிளவுபடுத்துதல் ஆய்வு செய்யப்பட்டது. பின்னர், p.Lys464Asn புரதத்தின் செயலாக்கம் செல்லுலோவில், மேற்கத்திய ப்ளாட்டிங் பகுப்பாய்வு மூலம் மதிப்பிடப்பட்டது.

c.1392G>T பிறழ்வு எக்ஸான் 10 ஸ்பிளிசிங்கை அதன் முழுமையான நீக்குதலைத் தூண்டி, பிரேம் ஷிப்ட் டிரான்ஸ்கிரிப்டை குறியாக்குகிறது. பாலிமார்பிசம் TG (11)T(5) இந்த பிறழ்வின் விளைவுகளை மாறுபட்ட பிளவுகளில் அதிகரிக்கிறது, இது சிக்கலான அலீலின் முக்கியத்துவத்தை பரிந்துரைக்கிறது. தாய்வழி காற்றுப்பாதை எபிடெலியல் செல்களிலிருந்து பெறப்பட்ட எம்ஆர்என்ஏவின் பகுப்பாய்வு செல்லுலோ முடிவுகளில் இதை உறுதிப்படுத்தியது. புரத அளவில் p.Lys464Asn புரதம் முழுமையாக கிளைகோசைலேட்டட் வடிவத்தைக் காட்டவில்லை.

இவ்வாறு, c.1392G>T பிறழ்வு தனியாகவோ அல்லது பாலி டி டிராக்டுடன் இணைந்தோ பிளவுபடுதல் மற்றும் CFTR புரதச் செயலாக்கத்தில் வெளிப்படையான தாக்கங்களை வெளிப்படுத்தியது. சி.[டி(5); 1392G>T] சிக்கலான அலீல் பிளவுபடுவதை பாதித்து கடுமையான தவறான செயலாக்கக் குறைபாட்டைத் தூண்டுவதன் மூலம் CF பினோடைப்பிற்கு பங்களிக்கிறது. கிளாசிக்கல் CFTR பிறழ்வு வகைப்பாடு போதுமானதாக இல்லை என்பதை இந்த முடிவுகள் நிரூபிக்கின்றன: ஒரு நோயாளியின் சாத்தியமான சிக்கலான அலீலின் உயிரியல் மற்றும் செல்லுலோ ஆய்வுகள் சரியான CFTR பிறழ்வு வகைப்பாடு, போதுமான மருத்துவ ஆலோசனை மற்றும் தழுவிய சிகிச்சை உத்திகளை வழங்க வேண்டும்.