ஃபிரான்செஸ்கோ நேரி, கேடரினா டி கிளெமென்டே, மொரிசியோ ஆர்லாண்டினி, கிளாடியா லென்டுசி, பிரான்செஸ்கா அன்செல்மி மற்றும் ஃபெடரிகோ கால்வாக்னி
குறிக்கோள்: பல்வேறு சிக்னலிங் பாதைகள் மற்றும் டிரான்ஸ்கிரிப்ஷன் காரணிகளின் வலையமைப்பின் சிக்கலான இடைவெளியின் மூலம் கரு ஸ்டெம் செல்கள் (ESC) ப்ளூரிபோடென்சி பராமரிக்கப்படுகிறது. இந்த ப்ளூரிபோடென்சி சுய புதுப்பித்தல் சுற்று பற்றி அதிகம் அறியப்பட்டாலும், ESC ப்ளூரிபோடென்சியிலிருந்து வெளியேறி வேறுபாட்டைத் தொடங்கும் மூலக்கூறு நிகழ்வுகள் தற்போது குறைவாகவே அறியப்படுகின்றன. அனைத்து டிரான்ஸ் ரெட்டினோயிக் அமிலம் (atRA), கரு வளர்ச்சி மற்றும் ESC வேறுபாட்டில் முக்கியமான மற்றும் ப்ளியோட்ரோபிக் பாத்திரங்களை வகிக்கிறது. தற்போதைய ஆய்வின் நோக்கம், ESC ஆல் atRA இன் ஆட்டோகிரைன் தொகுப்பைச் சரிபார்ப்பது, ESC ஐ கரு உடல்களாக (EBs) தன்னிச்சையாக வேறுபடுத்துவதில் அதன் பங்கைச் சோதிப்பது மற்றும் atRA தொகுப்புப் பாதையில் ஈடுபட்டுள்ள நொதிகள் மற்றும் புரதங்களின் வெளிப்பாட்டை பகுப்பாய்வு செய்வது.
முறைகள்: ESC, வேறுபடுத்தப்படாத அல்லது EB களாக வேறுபடுத்தி, atRA, ரெட்டினோல் அல்லது RAR எதிரியான CD2665 இல்லாத அல்லது முன்னிலையில் வளர்க்கப்பட்டது, மேலும் Brachyury வெளிப்பாடு ESC வேறுபாடு நிலையின் குறிப்பானாக பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டது. ESC அல்லது EBs-நிலைப்படுத்தப்பட்ட ஊடகம் ரெட்டினோல் இல்லாத நிலையில் அல்லது முன்னிலையில் தயாரிக்கப்பட்டு RARE-லூசிஃபெரேஸ் நிருபர் கலங்களில் சோதிக்கப்பட்டது. atRA உயிரியக்கவியல் பாதை கூறுகளின் RT-qPCR பகுப்பாய்வு வேறுபடுத்தப்படாத அல்லது வேறுபடுத்தும் ESC இல் செய்யப்பட்டது. இறுதியாக, ESC இல் நேரடி atRA இலக்கு மரபணுக்களை அடையாளம் காண மைக்ரோஅரே மரபணு வெளிப்பாடு சுயவிவரம் பயன்படுத்தப்பட்டது.
முடிவுகள்: இங்கே, atRA ஆனது ESC வேறுபாட்டின் ஆரம்பப் படிகளை ஊக்குவிக்கிறது என்பதையும், RDH1, RDH10, ADH3, RALDH2 மற்றும் CRABP2 போன்ற தன்னிச்சையான வேறுபாட்டின் போது, தன்னிச்சையான வேறுபாட்டின் போது atRA ஐ ஒருங்கிணைக்கும் திறனை ESC அதிகரிக்கிறது என்பதையும் நாங்கள் நிரூபிக்கிறோம். ESC இல் atRA ஆல் ஒழுங்குபடுத்தப்பட்ட 35 டிரான்ஸ்கிரிப்ஷன் காரணிகளில் (TFs), 3 TFகள் மேல்-ஒழுங்குபடுத்தப்பட்ட (Snai1, Gata6, Cdx1) ESC ப்ளூரிபோடென்சி வெளியேற்றத்தில் ஈடுபட்டதாக அறியப்படுகிறது மற்றும் 3 TFகள் கீழ்-ஒழுங்குபடுத்தப்பட்ட (Otx2, Id2 மற்றும் Arid1a) ESC ப்ளூரிபோடென்சியை பராமரித்தல்.
முடிவு: ESC இன் சாகுபடி மற்றும் கட்டுப்படுத்தப்பட்ட வேறுபாடு, மீளுருவாக்கம் மருத்துவம் மற்றும் வளர்ச்சியின் உயிரியல் ஆகிய இரண்டிலும் புதிய எல்லைகளைத் திறந்துள்ளது. EB களாக தன்னிச்சையான வேறுபாட்டின் போது RA ESC ஆல் ஒருங்கிணைக்கப்படுகிறது மற்றும் அவற்றின் சொந்த வேறுபாடு செயல்முறையை மேம்படுத்த ஒரு செயலில் பங்கு வகிக்கிறது என்பதை இங்கே நாங்கள் நிரூபித்தோம்.