மரபணு தொழில்நுட்பம்

சுருக்கம்

பிறவி இதய நோயால் பாதிக்கப்பட்ட நோயாளிகளுக்கு FOG2 மரபணுவின் பிறழ்வு பகுப்பாய்வு

பிருந்தா இளங்கோவன்

பிறவி இதய நோய் (CHD) என்பது வளர்ச்சிக் குறைபாட்டின் வகைகளில் ஒன்றாகும், குழந்தைகளில் நோயுற்ற தன்மை அதிகமாக உள்ளது. ஒரு டிரான்ஸ்கிரிப்ஷன் காரணி GATA பிணைப்பு காரணி 4 (GATA4) கரு உருவாக்கம் மற்றும் இதய வளர்ச்சியில் முக்கிய பங்கு வகிக்கிறது. FOG2 மரபணு பிறவி இதய நோயின் பிறழ்வு பகுப்பாய்வை மதிப்பிடுவதே ஆய்வின் நோக்கம் . இந்திய மக்கள்தொகையிலிருந்து CHD நோயாளிகளில் அரிதான மாறுபாடுகளை அடையாளம் காண FOG2 ஐத் தேர்ந்தெடுத்துள்ளோம் . FOG2 இன் பெரும்பாலான துத்தநாக விரல் டொமைன்கள் இந்த இரண்டு எக்ஸான்களில் உள்ளமைக்கப்பட்டிருப்பதால், ஆய்வை மதிப்பீடு செய்ய, எக்ஸான் 7 மற்றும் எக்ஸான் 8க்கான PCR பெருக்கத்தைச் செய்துள்ளோம். Exon 8 ஆனது 5 வெவ்வேறு பகுதிகளாகப் பிரிக்கப்பட்டது, அதாவது Exon 8A-8E நீண்ட குறியீட்டுப் பகுதியைக் கொண்டிருப்பதால். இந்த எக்ஸான்கள் வெவ்வேறு நிலைகளில் பெருக்கப்பட்டன. எடுத்துக்காட்டாக, எக்ஸான் 8A-B மற்றும் E ஆகியவை DMSO (Di-methyl-sulfo-oxide) அல்லது பீடைன் போன்ற PCR மேம்பாட்டாளர்களின் தேவையின்றி பிளாட்டினம் டாக் DNA பாலிமரேஸுடன் பெருக்கப்பட்டது. இருப்பினும், எக்ஸான் 8சி டிஎம்எஸ்ஓ முன்னிலையில் பெருக்கப்பட்டது. ஒவ்வொரு எக்ஸான்களுக்கும் அனீலிங் வெப்பநிலை வேறுபட்டது. எக்ஸான் 7 என்பது பெருக்கப்பட்ட Taq DNA பாலிமரேஸ் ஆகும். 100bp டிஎன்ஏ ஏணி மூலம் பெருக்கப்பட்ட பொருட்களின் தனித்தன்மை மற்றும் அளவு சரிபார்க்கப்படுகிறது.