உயிர் வேதியியல் & பகுப்பாய்வு உயிர்வேதியியல்

சுருக்கம்

வாய்வழி நோய்க்கிருமி உயிரினமான போர்பிரோமோனாஸ் ஜிங்கிவாலிஸிலிருந்து மெத்தியோனைன் காமா லைஸ்-டீமினேஸ் (எம்ஜிஎல்டி) சுத்திகரிப்பு மற்றும் சிறப்பியல்பு

டேவிட் மோர்கோஸ்1, பிராட் ஜே ஷ்மியர், அருண் மல்ஹோத்ரா மற்றும் வெங்கடாசலம் கே.வி 

போர்பிரோமோனாஸ் ஜிங்கிவாலிஸ் என்பது வாய்வழி நோய்க்கிருமி பாக்டீரியமாகும், இது மனிதர்களுக்கு வாய் துர்நாற்றம் (துர்நாற்றம்) மற்றும் பீரியண்டோன்டிடிஸ் ஆகியவற்றை ஏற்படுத்துகிறது. மெத்தியோனைன் காமா லைஸ்-டீமினேஸ் (எம்ஜிஎல்டி) மூலம் மெத்தியோனைன் சிதைவிலிருந்து உருவாகும் மெத்தில்தியால் போன்ற ஆவியாகும் கந்தக சேர்மங்கள் காரணமாக ஹலிடோசிஸ் வெளிப்படுகிறது. இந்த அறிக்கையில், பாக்டீரியல் வெளிப்பாடு அமைப்பைப் பயன்படுத்தி போர்பிரோமோனாஸ் ஜிங்கிவாலிஸ் எம்ஜிஎல்டியை குளோன் செய்து வெளிப்படுத்தினோம், மேலும் சுத்திகரிக்கப்பட்ட ஹோமோடெட்ராமெரிக் என்சைம் எல்-[1-14C]-மெத்தியோனைனை அடி மூலக்கூறாகப் பயன்படுத்தி ஒரு புதிய ஐசோடோப் மதிப்பீட்டால் வகைப்படுத்தப்பட்டது. Mgld என்பது PLP-சார்ந்த L-மெத்தியோனைன் CS lyasedeaminase ஆகும், இது L-மெத்தியோனைனின் காமா-கார்பன்-சல்பர் பிணைப்பை மெத்தில்தியோலுடன் பிளவுபடுத்துகிறது மற்றும் α-கெட்டோபியூட்ரேட் என்ற டீமினேட்டட் ஒட்டுமொத்த தயாரிப்பை உருவாக்குகிறது. எக்ஸோஜனஸ் 3H-L-2-அமினோபியூட்ரேட் என்சைம் அதிகப்படியான நிலைமைகளின் கீழ் 3H-α-கெட்டோபியூட்ரேட்டாக டீமினேட் செய்யப்படவில்லை என்பதைக் காண்கிறோம். எல்-மெத்தியோனைனில் இருந்து α-கெட்டோபியூட்ரேட் உருவாவதற்கான ஒட்டுமொத்த எதிர்வினையானது கிமீ 1.0 எம்எம், Vmax 5.27 μmol min-1 mg-1 மற்றும் ஒரு மோனோமெரிக் kcat/Km 3729.3 M-1 s-1 ஆகியவற்றை வெளிப்படுத்துகிறது. Mgld pH 8க்கு மேல் மற்றும் 37°-50°C வெப்பநிலை வரம்பில் உகந்த செயல்பாட்டை வெளிப்படுத்துகிறது. Mgld தடுப்புக்காக பல கலவைகள் சோதிக்கப்பட்டன. இயற்கை தயாரிப்பு DL-Propargylglycine மிகவும் பயனுள்ள Mgld தடுப்பானாக தனித்து நிற்கிறது, இதனால் ஹலிடோசிஸைக் கட்டுப்படுத்த இது பயனுள்ளதாக இருக்கும். Mgld ஆனது N-formylmethionine இல் கிட்டத்தட்ட எந்தச் செயல்பாட்டையும் கொண்டிருக்கவில்லை, இது நொதியுடன் ஒரு Schiff தளத்தை உருவாக்க அடி மூலக்கூறில் இலவச α-அமினோ-நைட்ரஜனின் தேவையை உறுதிப்படுத்துகிறது.