உயிர் வேதியியல் & பகுப்பாய்வு உயிர்வேதியியல்

சுருக்கம்

விலையில்லா ஃப்ளோரசன்ட் ஆப்டிகல் பிரைட்டனரைப் பயன்படுத்தி ஒரு பரிமாண பாலிஅக்ரிலாமைடு ஜெல் எலக்ட்ரோபோரேசிஸில் புரதங்களை விரைவாகக் கண்டறிதல்

சஷிதர் ஆர்.பி., தனுஜா கோசூரி மற்றும் சுஜாதா நாயக்

ஒரு வணிக துணி ஃப்ளோரசன்ட் ஆப்டிகல் பிரைட்னரான ராணிபால் ^® (F-OB), நேட்டிவ் மற்றும் SDS -1D-PAGE இல் புரதங்களைக் கறைப்படுத்த வெற்றிகரமாகப் பயன்படுத்தப்பட்டது . டிக்ளோரோமீத்தேன் மற்றும் தண்ணீரின் பைபாசிக் கரைப்பான் அமைப்பைப் பயன்படுத்தி F-OB சுத்திகரிக்கப்பட்டது. சுத்திகரிக்கப்பட்ட மற்றும் கச்சா F-OB இன் R _f மதிப்பு (0.63) TLC இல் ஒப்பிடத்தக்கது. சுத்திகரிக்கப்பட்ட F-OB இன் மாஸ் ஸ்பெக்ட்ரோமெட்ரி அடிப்படை உச்சத்தை 414 (m/z) இல் குறிக்கிறது. F-OB இன் உறிஞ்சுதல் மற்றும் உமிழ்வு அதிகபட்சம் முறையே 350 nm மற்றும் 430 nm என கண்டறியப்பட்டது. எஃப்-ஓபி பூர்வீக ஜெல்லில், முன் மற்றும் பிந்தைய எலக்ட்ரோஃபோரெடிக் ஓட்டத்தில் புரதங்களைக் கறைபடுத்தும். போஸ்ட் எலக்ட்ரோஃபோரெடிக் கறை விரைவாக இருந்தது மற்றும் படிந்த புரதங்களைக் காட்சிப்படுத்த 20 நிமிடம் தேவைப்பட்டது. மறுபுறம், SDS ஜெல்களில், F-OB உடன் புரதங்களைக் கறைபடுத்துவதற்கு முன், SDS ஐ பிரித்தெடுக்க கூடுதலாக 20 நிமிடம் தேவைப்பட்டது. எஃப்-ஓபியை புரதங்களுடன் பிணைப்பதில் எஸ்டிஎஸ் குறுக்கிடுவது கண்டறியப்பட்டது. மூலக்கூறு எடை குறிப்பான்களின் மாறுபட்ட செறிவுகள் ஏற்றப்பட்டன மற்றும் அவற்றின் ஒளிரும் தீவிரம் புரதங்களின் செறிவுக்கு எதிராக திட்டமிடப்பட்டது. r ² மதிப்புகள் 0.965 முதல் 0.997 வரையிலான சிறந்த நேர்கோட்டுத்தன்மையைக் குறிக்கிறது. கார்போனிக் அன்ஹைட்ரேஸின் கண்டறிதல் 8.0-800 ng வரம்பில் இருந்தது. புரதக் கறையைப் பயன்படுத்துவதற்குப் பயன்படுத்தப்படும் பெரும்பாலான சாயங்களைப் போலல்லாமல், F-OB உடன் கறையை தொட்டி தாங்கலில் (2 mg/100 mL) மேற்கொள்ளலாம், மேலும் அது மீளக்கூடியதாகவும் இருந்தது. F-OB, புரதங்களைக் கறைபடுத்துவதற்கு மிகவும் செலவு குறைந்த ஃப்ளோரசன்ட் சாயமாக இருக்கலாம் (US $ 0.04/25.0 g). பாலிஅக்ரிலாமைடு ஜெல்களில் புரதங்களை கறைபடுத்துவதற்கு மாற்றாக F-OB எளிமையானது, பாதுகாப்பானது, உணர்திறன், குறைந்த நேரத்தை எடுத்துக்கொள்வது மற்றும் சிக்கனமான ஃப்ளோரசன்ட் சாயம் என கண்டறியப்பட்டது.