பார்மசூட்டிகா அனலிட்டிகா ஆக்டா

சுருக்கம்

100 சுத்திகரிப்பு சுழற்சிகளில் ஒரு மோனோக்ளோனல் ஆன்டிபாடியை சுத்திகரிக்க பயன்படுத்தப்படும் நிறுவப்பட்ட அஃபினிட்டி குரோமடோகிராபி செயல்முறையின் செயல்திறனில் குறிப்பிடத்தக்க மேம்பாடுகள்

வில்லியம்ஸ் ஃபெரோ, ரோடோல்போ வால்டெஸ், யூடிமியோ பெர்னாண்டஸ், யாரிசெல் குவேரா, யெனிஸ்லி மெடினா, டாட்டியானா அல்வாரெஸ், ஆண்ட்ரெஸ் தமயோ, டாட்டியானா கோன்சாலஸ், மைரா வூட், மேலின் லா ஓ, யோடெல்விஸ் கால்வோ மற்றும் டெபோரா கெடா

புரோட்டீன் ஏ-செபரோஸ் அஃபினிட்டி குரோமடோகிராபி என்பது மருந்துப் பயன்பாட்டிற்கான இம்யூனோகுளோபுலின்களை சுத்திகரிக்க மிகவும் வெற்றிகரமான முறையாகும். இருப்பினும், இந்த முறையின் குரோமடோகிராஃபி செயல்திறன் மற்றும் வாழ்நாள் ஆகியவை குறிப்பிட்ட நிறமூர்த்த நிலைகளுக்கு (உயிரியல் ஆதாரம், பஃபர்கள், ஓட்ட விகிதங்கள், ஆன்டிபாடி பண்புகள், வெப்பநிலை, புரதச் செறிவு, சுத்தம் செய்யும் நெறிமுறை போன்றவை) எப்போதும் சரிசெய்யப்பட வேண்டும். ஹெபடைடிஸ் பி தடுப்பூசியின் செயலில் உள்ள மருந்து மூலப்பொருளைச் சுத்திகரிப்பதில் பயன்படுத்தப்படும் CB.Hep-1 மோனோக்ளோனல் ஆன்டிபாடியை (mAb) சுத்திகரிக்க பயன்படுத்தப்படும் ஒரு நிறுவப்பட்ட அஃபினிட்டி குரோமடோகிராபி செயல்முறையின் செயல்திறனில் முன்னேற்றங்களை நிரூபிக்க இந்த ஆய்வு முயன்றது. முடிவில், 150 mM PBS இல் காணப்பட்ட ஒப்பீட்டளவில் மோசமான mAb மீட்பு; pH 8.0/100 mM சிட்ரிக் அமிலம்; pH 3.0 இடையக அமைப்பு நிலைமைகள் மேட்ரிக்ஸ் மற்றும் mAb க்கு இடையேயான தொடர்புகளை முற்றிலும் சீர்குலைக்க எலுஷன் பஃப்பரின் திறமையின்மை காரணமாகக் கூறப்பட்டது. இது சம்பந்தமாக, மேட்ரிக்ஸில் CB.Hep-1 mAb ஐ தக்கவைத்துக்கொள்வது மேட்ரிக்ஸுடன் இணைக்கப்பட்ட தசைநார் மூலம் உதவியது மற்றும் குறிப்பிடப்படாத தொடர்புகளால் அல்ல. 1.5M கிளைசின்-NaOH/3M NaCl; pH 9.0/200 mM கிளைசின்-HCl; pH 2.5 இடையக அமைப்பு 100 சுத்திகரிப்பு சுழற்சிகளில் mAb தூய்மை, மூலக்கூறு ஒருமைப்பாடு, தசைநார் கசிவு மற்றும் மவுஸ் DNA உள்ளடக்கம் ஆகியவற்றை பாதிக்காமல் அஃபினிட்டி குரோமடோகிராபி மீட்டெடுப்பை கணிசமாக மேம்படுத்தியது. இவ்வாறு, 1.5M கிளைசின்-NaOH/3M NaCl பயன்பாடு; pH 9.0/200 mM கிளைசின்-HCl; இடையக அமைப்பாக pH 2.5 முறையே CB.Hep-1 mAb மற்றும் ஹெபடைடிஸ் B தடுப்பூசி செலவுகளைக் குறைக்க அனுமதித்தது.