சையத் என் அல்வி, அகமது யூசுப் மற்றும் முஹம்மது எம் ஹம்மாமி
வைட்டமின் D-2 (VD-2), வைட்டமின் D-3 (VD-3), 25-ஹைட்ராக்ஸிவைட்டமின் D-2 [25 (OH) VD-2 ஆகியவற்றை ஒரே நேரத்தில் தீர்மானிப்பதற்கான எளிய மற்றும் நம்பகமான உயர் செயல்திறன் திரவ குரோமடோகிராபி (HPLC) முறை ], மற்றும் மனித பிளாஸ்மாவில் 25-ஹைட்ராக்ஸிவைட்டமின் D-3 [25(OH) VD-3] உருவாக்கப்பட்டு சரிபார்க்கப்பட்டது. பிளாஸ்மா மாதிரிகள் மெத்தனால் மற்றும் 2-புரோபோனால் கலவையுடன் டிபுரோட்டீனைஸ் செய்யப்பட்டு, ஹெக்ஸேன் மூலம் பிரித்தெடுக்கப்பட்டன. ஆவியாக்கப்பட்ட பிறகு, எச்சம் மெத்தனாலில் கரைக்கப்பட்டது:நீர் (9.6:0.4, v/v), மையவிலக்கு, பின்னர் தெளிவான தீர்வு Zorbax C18 பத்தியில் செலுத்தப்பட்டது. மொபைல் கட்டம் (கிரேடியன்ட் எலுஷன் பயன்முறை) மெத்தனால், அசிட்டோனிட்ரைல் மற்றும் நீர் (pH = 3.0) ஆகியவற்றைக் கொண்டுள்ளது; ஃபோட்டோடியோட் அரே டிடெக்டர் (அலைநீளம் 265 nm இல் அமைக்கப்பட்டது) மூலம் எலுவெண்டுகள் கண்காணிக்கப்பட்டன. பிளாஸ்மாவில் உள்ள VD-2, VD-3, 25(OH) VD-2, 25(OH) VD-3 ஆகியவற்றின் செறிவு மற்றும் IS க்கு அவற்றின் உச்ச பகுதி விகிதம் 5 - 100 ng/ வரம்பில் நேரியல் எம்.எல். இடை-நாள் மற்றும் உள்-நாள் மதிப்பீட்டிற்கான மாறுபாட்டின் குணகங்கள் அனைத்தும் ≤ 9.7% மற்றும் சார்புகள் ≤ 13.1% ஆகும். பிளாஸ்மாவிலிருந்து VD-2, VD-3, 25(OH) VD-2 மற்றும் 25(OH) VD-3 ஆகியவற்றின் சராசரி பிரித்தெடுத்தல் மீட்டெடுப்புகள் அனைத்தும் 80% க்கும் அதிகமாக இருந்தன. ஆரோக்கியமான நபர்களிடமிருந்து பெறப்பட்ட பிளாஸ்மாவில் வைட்டமின் டி அளவைக் கண்டறிய இந்த முறை பயன்படுத்தப்பட்டது. மேலும், மருத்துவ ஆய்வகத்தில் சந்திக்கும் பல்வேறு நிலைமைகளின் கீழ் பிளாஸ்மாவில் உள்ள VD-2, VD-3, 25(OH) VD-2, மற்றும் 25(OH) VD-3 ஆகியவற்றின் நிலைத்தன்மையை மதிப்பிட இது பயன்படுத்தப்பட்டது.