பேட்ரிக் டெரன்ஸ் ப்ரூக்ஸ், மைக்கேல் ஆபெக் ராஸ்முசென் மற்றும் பால் ஹைட்டல்
நோக்கம்: தற்போதைய ஆய்வு தூண்டப்பட்ட ப்ளூரிபோடென்ட் ஸ்டெம் செல்கள் (iPSC கள்) இலிருந்து பெறப்பட்ட முப்பரிமாண (3D) மனித நரம்பு திசுக்களை உருவாக்குவதற்கான ஒரு முறையை நிறுவுவதை நோக்கமாகக் கொண்டுள்ளது மற்றும் திசு அல்ட்ராஸ்ட்ரக்சர் மற்றும் நரம்பியல் குறிப்பான்களின் வெளிப்பாடு ஆகியவற்றின் கலவையின் மூலம் விளைவுகளை பகுப்பாய்வு செய்கிறது.
முறைகள்: மனித iPSC களை 3D சாரக்கட்டு அடிப்படையிலான நரம்பியல் வேறுபாடு நெறிமுறைக்கு உட்படுத்துவதன் மூலம் இரண்டு-படி செல் கலாச்சார செயல்முறை செயல்படுத்தப்பட்டது. முதலில், நியூரோபிதெலியல் மோனோலேயரை உருவாக்க நரம்பியல் விதியைத் தூண்டும் சிறிய மூலக்கூறுகள் பயன்படுத்தப்பட்டன. இரண்டாவதாக, மோனோலேயர் ஒற்றை செல்களாக டிரிப்சினைஸ் செய்யப்பட்டு நுண்ணிய பாலிஸ்டிரீன் சாரக்கட்டுக்குள் விதைக்கப்பட்டு 3D நரம்பு திசுக்களை உருவாக்க மேலும் வளர்க்கப்பட்டது. நரம்பு திசு இம்யூனோஹிஸ்டோ கெமிஸ்ட்ரி மற்றும் டிரான்ஸ்மிஷன் எலக்ட்ரான் மைக்ரோஸ்கோபி (TEM) ஆகியவற்றின் கலவையால் வகைப்படுத்தப்பட்டது .
முடிவுகள்: iPSCகள் 3D நரம்பியல் திசுவை வெளிப்படுத்தும் நரம்பியல் முன்னோடி செல்கள், ஆரம்பகால நரம்பியல் வேறுபாடு மற்றும் முதிர்ச்சி, ரேடியல் கிளைல் செல்கள் மற்றும் SOX2, Nestin, β-III Tubulin, MAP2, Tau, BLBP மற்றும் Ki67 உள்ளிட்ட செல்லுலார் பெருக்கம் ஆகியவற்றுக்கான குறிப்பான்களை வெளிப்படுத்துகின்றன. வளரும் நரம்புக் குழாயின் உருவ அமைப்பை ஒத்த ஏராளமான ரொசெட் கட்டமைப்புகளைக் கண்டறிந்தோம். இந்த நரம்பியல் குழாய் போன்ற கட்டமைப்புகள் (NTLS) நரம்பியல் முன்னோடி உயிரணு பராமரிப்பு மற்றும் பெருக்கத்தின் பகுதிகளைக் கொண்டிருப்பதாகக் காட்டப்பட்டது . லுமினல் இறுக்கமான சந்திப்புகள் மற்றும் முதன்மை சிலியாவை நிரூபிக்கும் TEM பகுப்பாய்வுகளால் கரு நரம்புக் குழாயின் ஒற்றுமை மேலும் ஆதரிக்கப்பட்டது. மேலும், NTLS ஆனது ரேடியல் க்ளியல் போன்ற செல்களைக் கொண்டிருந்தது, லுமினில் இருந்து கதிர்வீச்சு மற்றும் நரம்பியல் முன்னோடி செல்கள் நீளமான கருக்களை வழங்குகின்றன, ஆரம்பகால நியூரோஜெனீசிஸ் மற்றும் மைட்டோஸ்களின் போது இண்டர்கினெடிக் நியூக்ளியர் இடமாற்றத்தில் காணப்படும் நியூக்ளியஸ் டிரான்ஸ்போசிஷனை சமிக்ஞை செய்கிறது.
முடிவு: மனித iPSCகளுக்கான இந்த ஒப்பீட்டளவில் எளிமையான 3D சாரக்கட்டு அடிப்படையிலான நரம்பியல் வேறுபாடு நெறிமுறை ஆரம்பகால நரம்பியல் வளர்ச்சியில் பல முக்கிய நிகழ்வுகளை மறுபரிசீலனை செய்ய முடிந்தது என்பதை எங்கள் கண்டுபிடிப்புகள் வெளிப்படுத்தின. NTLS இல் உள்ள அமைப்பு மற்றும் இந்த கட்டமைப்புகளைச் சுற்றியுள்ள திசுக்களில் முதிர்ந்த நரம்பு செல்கள் இருப்பது இந்த நெறிமுறை நரம்பியல் வளர்ச்சி மற்றும் நோய் மாடலிங் பற்றிய விட்ரோ ஆய்வுகளுக்கான திறனைக் கொண்டுள்ளது என்பதைக் காட்டுகிறது.