உயிர் வேதியியல் & பகுப்பாய்வு உயிர்வேதியியல்

சுருக்கம்

எரி பட்டுப்புழு, பிலோசாமியா ரிசினி (லெபிடோப்டெரா: சாதுனிடே) ஐந்தாவது இன்ஸ்டார் லார்வாவில் புரதம் மற்றும் என்சைம்களின் அளவுகளில் குறைந்த வெப்பநிலை வெளிப்பாட்டின் தாக்கம் குறித்த டைம் கோர்ஸ் ஆய்வுகள்

அனிதா சிங், விவேக் குமார் குப்தா, நிகத் ஜமால் சித்திக், ஷைலி திவாரி, அனிதா கோபேஷ் மற்றும் பெச்சன் ஷர்மா

லாக்டேட் டீஹைட்ரோஜினேஸ் (LDH; EC 1.1.1.27) மற்றும் மாலேட் டீஹைட்ரஜனேஸ் (MDH; EC 1.1.1.37) ஆகியவை எரி பட்டுப்புழு, பிலோசாமியா ரிசினியின் ஆற்றல் வளர்சிதை மாற்றத்தில் ஈடுபடும் நொதிகள் ஆகும். இருப்பினும், எரி பட்டுப்புழுவின் வெவ்வேறு திசுக்களில் அவற்றின் அளவுகளில் குறைந்த வெப்பநிலை வெளிப்பாட்டின் விளைவு பற்றி முந்தைய ஆய்வு எதுவும் தெரிவிக்கப்படவில்லை. தற்போதைய ஆய்வு, மூன்று முக்கிய திசுக்களின் (ஹீமோலிம்ப், பட்டு சுரப்பி மற்றும் கொழுப்பு உடல்) புரதம் மற்றும் ஆற்றல் வளர்சிதை மாற்ற நொதிகளின் அளவுகளில் 5 வது இன்ஸ்டார் பி. ரிசினியின் குறைந்த வெப்பநிலை (~10°C) வெளிப்பாட்டின் நேர-படிப்பு விளைவுகளை இலக்காகக் கொண்டது. ஆமணக்கு எண்ணெய் தாவரத்தின் (ரிசினஸ் கம்யூனிஸ்) புதிய இலைகளில் வளர்க்கப்படும் எரி பட்டுப்புழு லார்வாக்கள் 4 குழுக்களாகப் பிரிக்கப்பட்டன: ஒரு கட்டுப்பாட்டுக் குழு 25 ± 2°C இல் வளர்க்கப்பட்டது, மூன்று சோதனைக் குழுக்களுடன் 10 ± 1°C இல் வளர்க்கப்பட்டது 50 ஒவ்வொன்றிலும் லார்வாக்கள், வெவ்வேறு காலங்களுக்கு (2, 4 மற்றும் 7 நாட்கள்). செல் இல்லாத சாறு 9000 கிராம் திசு ஹோமோஜெனேட்டை மையவிலக்கு செய்வதன் மூலம் தயாரிக்கப்பட்டது மற்றும் உயிர்வேதியியல் மதிப்பீடுகளுக்கு பயன்படுத்தப்பட்டது (மொத்த புரத உள்ளடக்கம், லாக்டேட் டீஹைட்ரோஜினேஸ் மற்றும் மாலேட் டீஹைட்ரஜனேஸ் செயல்பாடுகள்). ஐசோசைம் பகுப்பாய்விற்காக, 0.2 M சுக்ரோஸ் மற்றும் 10 mM EDTA ஆகியவற்றைக் கொண்ட பஃபரில் (0.2 M Tris HCl, pH 7.0) மற்றொரு ஹோமோஜெனேட்டுகள் (20% w/v) தயாரிக்கப்பட்டு, நேட்டிவ்-PAGE ஆல் பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டு செயல்பாட்டுக் கறை படிந்தன. லாக்டேட் டீஹைட்ரோஜினேஸ் மற்றும் மாலேட் டீஹைட்ரோஜினேஸ் ஆகியவற்றின் செயல்பாடுகள் ஹீமோலிம்பில் குறிப்பிடத்தக்க குறைவைக் காட்டியது, அதேசமயம் கொழுப்பு உடல்களில் இரண்டு நொதிகளும் அதிகரித்த செயல்பாட்டைக் காட்டியது. பட்டு சுரப்பியில், லாக்டேட் டீஹைட்ரோஜினேஸ் செயல்பாடு ஒரே மாதிரியாக குறைந்தது, அதேசமயம் மாலேட் டீஹைட்ரோஜினேஸ் செயல்பாடு அனைத்து வெளிப்பாடு காலங்களிலும் அதிகரித்தது. ஐசோசைம் பகுப்பாய்வு அவற்றின் வெளிப்பாடு சுயவிவரங்களில் குறிப்பிடத்தக்க இடையூறுகளை வெளிப்படுத்தியது. குறைந்த வெப்பநிலை வெளிப்பாட்டின் விளைவாக ஹீமோலிம்பில் புரத உள்ளடக்கம் குவிந்து பட்டு சுரப்பி மற்றும் கொழுப்பு உடல் திசுக்களில் குறைவு ஏற்பட்டது. இந்த நிலையில் கொழுப்பு உடல்கள் முக்கிய ஆற்றல் உற்பத்தி உறுப்பு வெளிப்பட்டது. லாக்டேட் டீஹைட்ரோஜினேஸ் மற்றும் மாலேட் டீஹைட்ரோஜினேஸ் சோதனை செய்யப்பட்ட அனைத்து திசுக்களிலும் ஒரே ஒரு ஐசோசைம் இருப்பதைக் காட்டுகிறது. குறைந்த வெப்பநிலையை நோக்கி லாக்டேட் டீஹைட்ரோஜினேஸ் மற்றும் மாலேட் டீஹைட்ரஜனேஸ் ஆகியவற்றின் ஐசோசைம் நடத்தை வெவ்வேறு திசுக்களில் மாறுபடுகிறது. இந்த என்சைம்களின் வெளிப்பாடு மற்றும் செயல்பாடுகளில் ஏற்படும் மாற்றங்கள் குறைந்த வெப்பநிலையில் லார்வாக்களின் பழக்கவழக்கத்துடன் தொடர்புடையதாக இருக்கலாம் என்று இந்த முடிவுகள் பரிந்துரைத்தன.